Plataforma de Biomarcadors en Fluids
El compromís de la Plataforma de Biomarcadors en Fluids és proporcionar als investigadors la tecnologia d’immunodetecció més avançada per a l'anàlisi de biomarcadors en diferents fluids biològics.
La Plataforma es va establir l'any 2022 i consta d'un laboratori de 100 m², totalment equipat amb diferents tecnologies d'immunodetecció estàndard i d'última generació per a l'anàlisi de mostres biològiques i el desenvolupament de nous assaigs. A més, està equipada amb tres ultracongeladors, congeladors de -20ºC i frigorífics de 4ºC, tots ells controlats per dos sistemes de control de temperatura diferents. Això ens permet garantir l'emmagatzematge correcte i segur de les mostres i els reactius dels kits d'anàlisis.
Oferim serveis analítics i validació d'assajos en diferents biofluids, utilitzant la tecnologia disponible al nostre abast. A més, oferim un suport complet durant tot el procés de desenvolupament de biomarcadors, inclosa la identificació de nous biomarcadors candidats i el desenvolupament de nous assajos per facilitar la seva implementació clínica.
Quanterix Simoa HD-X Analyzer™
La tecnologia SIngle MOlecular Array (SIMOA®) és una plataforma d'immunoassaig digital ultrasensible que s’utilitza per al mesurament de nivells molt baixos de biomarcadors en fluids. Aquesta tecnologia basada en microesferes paramagnètiques acoblades a anticossos, permet la detecció de biomarcadors amb una sensibilitat 1000 vegades més gran que els immunoassaigs tradicionals, assolint nivells de l’ordre de femtomolar.
El Simoa HD-X Analyzer™ és el model més avançat i totalment automatitzat de la plataforma d'immunoassaig Simoa®. Aquest model ofereix una capacitat d’anàlisis utilitzant volums de mostra mínims i la possibilitat de realitzar mesures simultànies de fins a sis biomarcadors diferents en una mostra, utilitzant un sol assaig i sense afectar la seva sensibilitat i precisió.
El Simoa HD-X Analyzer™ és compatible amb tots els kits d'anàlisis validats de Simoa® (kits d'assaig Simoa HD-X) o amb kits desenvolupats a mesura per l’usuari per a l'anàlisi de biomarcadors en plasma, sèrum, LCR i lisats cel·lulars. L'algorisme de Simoa® és una tecnologia patentada que utilitza mesures digitals o analògiques, segons les diferents concentracions del biomarcador, oferint un rang dinàmic notable de més de quatre ordres de magnitud.
Alguns dels biomarcadors disponibles inclouen: proteïnes amiloides (Aβ40 i Aβ42), cadena lleugera del neurofilament (Nf-L), proteïna àcida fibril·lar glial (GFAP), formes fosforilades diferents de proteïna Tau (pTau181, pTau231 i pTau217) i el marcador de neurodegeneració "Brain-derived Tau" (BD-Tau).
MESO QuickPlex SQ 120MM
La tecnologia Meso Scale Discovery (MSD) és una tecnologia d’ELISA basada en electroquimioluminescència (ECL) que s'utilitza per mesurar proteïnes individuals o múltiples en una mostra biològica.
La tecnologia MSD utilitza un marcatge SULFO-TAG de l’anticòs secundari per generar un senyal ELC activat per un corrent elèctric. Això millora el senyal quimioluminiscent de l'assaig alhora que redueix el soroll de fons, permetent la quantificació de proteïnes amb una sensibilitat, especificitat i un rang dinàmic més alts.
El MESO QuickPlex SQ 120MM és l'instrument més versàtil del MSD que permet realitzar lectures en períodes breus de temps (90 segons per placa), utilitzant un volum de mostra baix i de manera compatible amb una àmplia gamma d'assajos MSD.
La cartera d'assaigs de MSD inclou una àmplia gamma de kits per a l'anàlisi de biomarcadors en matrius biològiques diverses de diferents espècies animals, aplicables a diversos camps de recerca biomèdica. Aquests inclouen neurodegeneració, citocines, immunologia/inflamació, lesió cardíaca, oncologia i molts més. Els kits d’anàlisis es presenten en dissenys Singleplex, per a l'anàlisi d’un sol biomarcador, o Multiplex per a l’anàlisi de fins a 10 proteïnes diferents en la mateixa mostra (catàleg de kits d'assaig MSD). A més, la tecnologia MSD es pot adaptar per al desenvolupament de nous assaigs o la personalització de panells Multiplex.
LUMIPULSE G1200
El Lumipulse G1200 és una plataforma de diagnòstic desenvolupada per Fujirebio. És un instrument totalment automatitzat per a la quantificació de proteïnes per immunoassaig enzimàtic quimioluminiscent (CLEIA).
Aquesta tecnologia ofereix una sensibilitat major per a la mesura de diversos biomarcadors en mostres de sang i LCR, gràcies a l'ús de microesferes ferromagnètiques conjugades a l'anticòs de captura. Això permet una separació eficient de les molècules diana, que posteriorment són detectades mitjançant un anticòs secundari lligat a un enzim que, en contacte amb un substrat quimioluminiscent, catalitza una reacció que produeix llum.
Actualment el Lumipulse G1200 és compatible amb el catàleg d'assajos de Fujirebio, format per marcadors de qualitat provada que cobreix camps com la neurodegeneració (p.ej. pTau217, pTau181, Aß40, Aß42, Nf-L, etc.) la oncologia, les malalties infeccioses, la fertilitat, la diabetis i el metabolisme ossi (catàleg Fujirebio).
TECNOLOGIA SIMOA PLANAR ARRAY SP-X
La tecnologia Simoa Planar Array SP-X és una plataforma d'immunodetecció desenvolupada per a la detecció Multiplex de biomarcadors de proteïnes a concentracions molt baixes.
Aquesta plataforma utilitza una tecnologia d'impressió d'anticossos de captura d'alta densitat i un disseny de punt circular a la base dels pouets, que li permet aconseguir una alta sensibilitat de detecció. La quantificació s'aconsegueix mitjançant la detecció d’un senyal quimioluminescent, utilitzant una càmera d'alta resolució des de la part inferior de la placa. La combinació de dues imatges capturades amb diferents temps d'exposició, i l'algoritme d'anàlisi desenvolupat per Simoa per a una recollida de senyal òptima permet una reducció millor del soroll de fons i una sensibilitat major.
Hi ha una àmplia gamma d'assajos desenvolupats disponibles per a estudis en diferents àrees terapèutiques, però amb un enfocament especial en immunologia i oncoimmunologia (assaigs Simoa SP-X). Aquesta tecnologia planar també està oberta al desenvolupament d'assaigs ultrasensibles personalitzats.
ELISA i Western Blot
Oferim anàlisis complets mitjançant la tècnica d’ELISA, utilitzant kits d'assaig disponibles comercialment o personalitzats per a diferents mostres de biofluids. Tenim un protocol de validació d’immunoassaigs implementat que garanteix la qualitat de la prova d’ELISA emprada per a l'anàlisi del biomarcador proteic desitjat en diferents matrius biològiques. A més, donem suport al desenvolupament de nous assaigs d'immunodetecció segons els nostres procediments operatius estàndard. Amb aquesta finalitat, estem equipats amb:
Tecnologia bàsica per a ELISA estàndar mitjançant la detecció de senyal colorimètric:
- Lector d'absorció de microplaques (Tecan Sunrise)
- Rentadora de microplaques (Tecan Hydrospeed)
El nostre catàleg d'assajos validats inclou:
- PDGFRβ humà (receptor beta del factor de creixement derivat de plaquetes): validat per a l'anàlisi de plasma i LCR.
- LCN-2 humà (lipocalina 2 / N-GAL): validat per a l'anàlisi de plasma i LCR.
- YKL-40 humà (glicoproteïna de cartílag humà o GP-39): validat per a l'anàlisi de plasma i LCR.
Equip bàsic per a Western Blot (Bio-Rad):
- Sistema de colada en gel per electroforesi
- Tanc d'electroforesi
- Sistema d’electrotransferència
- Font d'alimentació d'electroforesi
- Sistema de captura d’imatge
Contacta'ns
Javier Torres
Responsable de la plataforma
fluid.biomarkers.facility@barcelonabeta.org
+34 93 326 31 58